实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (2): 226-232.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.02.019
摘要:
目的 探讨长链非编码 lncRNA DBH⁃AS1(DBH⁃AS1)对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响及 机制。方法 采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT⁃PCR)检测瘢痕疙瘩和正常皮肤组织中 DBH⁃ AS1、MicroRNA⁃138(miR⁃138)和 Hypoxia⁃inducible factor⁃1α(HIF⁃1α)的 mRNA 表达水平。采用双荧光素酶 报告分析三者的结合情况。采用流式细胞技术、qRT⁃PCR 和免疫印迹法(Western blot)检测敲低或过表达 DBH⁃AS1 对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,并分析 miR⁃138 和 HIF⁃1α的表达变化。结果 DBH⁃AS1 和 HIF⁃1α瘢痕疙瘩组织和细胞中显著上调,而 miR⁃138 明显下调(P < 0.05)。双荧光素酶结果显示 DBH⁃AS1 能够靶向结合 miR⁃138,miR⁃138 能够靶向结合 HIF⁃1α。低表达 DBH⁃AS1 或过表达 miR⁃138 明显促进瘢痕 疙瘩成纤维细胞凋亡。敲低 miR⁃138 能逆转沉默 DBH⁃AS1 对瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡的影响,敲低 HIF⁃ 1α显著抑制沉默 miR⁃138 对细胞凋亡的作用(P < 0.05)。结论 低表达 DBH⁃AS1 能够通过调控 miR⁃138/ HIF⁃1α通路促进瘢痕疙瘩成纤维细胞凋亡,提示DBH⁃AS1