序贯培养液与一步式培养液对早期胚胎发育影响的同胞卵对照研究

doi:10.3969/j.issn.1006-5725.2026.17.022

摘要/Abstract

摘要：

目的比较序贯培养液与一步式培养液在体外受精/卵胞质内单精子注射（IVF/ICSI）早期胚胎发育中的应用效果，并评估不同配方一步式培养液对胚胎发育的影响差异。方法回顾性分析2025年6—12月行IVF/ICSI助孕、单周期获卵数≥ 10枚的259例患者，共3 578枚成熟卵母细胞。采用同胞姐妹卵对照设计，将同一患者的卵母细胞随机分为序贯培养液组和一步式培养液组，后者按不同配方进一步分为6个亚组（OS-1组 ~ OS-6组）。比较两组及亚组间早期胚胎发育指标及第3天（Day 3）卵裂球融合情况。结果两组胚胎卵裂率、优质胚胎率、囊胚形成率、可利用囊胚率及临床妊娠率差异均无统计学意义（P > 0.05）。一步式培养液组优质囊胚率低于序贯培养液组（31.36% vs. 39.80%，P < 0.001），Day 3卵裂球融合率高于序贯培养液组（6.69% vs. 3.55%，P < 0.001）。多因素分析显示，一步式培养液与优质囊胚获得率降低独立相关（OR = 0.700，95%CI：0.571 ~ 0.859，P < 0.001）。亚组分析：OS-1组Day 3可利用胚胎率降低（P = 0.003）；OS-3组和OS-4组优质囊胚率降低（P = 0.004，P = 0.037）；OS-5组Day 3优质胚胎率降低（P = 0.045）。OS-2组和OS-6组差异均无统计学意义（P > 0.05）。结论一步式培养液总体可获得与序贯培养液相当的早期胚胎发育效果，但部分配方在优质囊胚率等方面略低，且Day 3卵裂球融合率较高，临床应用需个体化选择。

关键词: 体外受精, 胚胎培养液, 序贯培养, 一步式培养, 优质囊胚率, 卵裂球融合

Abstract:

Objective To compare the effects of sequential culture media and single-step culture media on early embryonic development in IVF/ICSI procedures， and to assess the differences between different single-step culture medium formulations. Methods This study conducted a retrospective analysis of 259 patients who obtained ≥10 retrieved oocytes per cycle between June and December 2025， with a total of 3，578 mature oocytes included. A sibling oocyte study design was adopted to compare early embryo development indicators and Day 3 blastomere fusion between the sequential culture medium group and the single-step culture medium group， where the latter was further divided into 6 subgroups： OS-1 to OS-6. Results No statistically significant differences were observed between the two groups in the 2PN cleavage rate， Day 3 good-quality embryo rate， blastocyst formation rate， usable blastocyst rate， or clinical pregnancy rate （all P > 0.05）. Compared with the sequential culture group， the single-step culture group exhibited a lower high-quality blastocyst rate （31.36% vs. 39.80%， P < 0.001） and a higher Day 3 cell fusion rate （6.69% vs. 3.55%， P < 0.001）. Multivariate regression analysis demonstrated that single-step culture medium was independently associated with decreased odds of obtaining high-quality blastocysts （OR = 0.700， 95%CI： 0.571-0.859， P < 0.001）. Subgroup analysis yielded the following results： the OS-1 subgroup presented a reduced Day 3 usable embryo rate （P = 0.003）； the OS-3 and OS-4 subgroups showed decreased high-quality blastocyst rates （P = 0.004， P = 0.037 respectively）； the OS-5 subgroup had a lower Day 3 good-quality embryo rate （P = 0.045）. No statistically significant differences were detected between groups in the OS-2 and OS-6 subgroups（P > 0.05）. Conclusions Single-step culture media generally yield comparable early embryonic development outcomes to sequential culture media. However， certain single-step formulations exhibit slightly lower rates of high-quality blastocyst formation alongside higher rates of Day 3 embryonic cell fusion， indicating that individualized medium selection is required in clinical practice.

Key words: in vitro fertilization, embryo culture medium, sequential culture, single-step culture, high-quality blastocyst rate, blastomere fusion

中图分类号:

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图/表 6

表1

表2

表3

表4

表5

表6

不同配方一步式培养液与序贯培养液早期胚胎发育情况比较 (%)"

组别

Day 3可利用胚胎率

Day 3优质胚胎率

囊胚形成率

优质囊胚率

可利用囊胚率

OS⁃1组

64.50（129/200） vs. 77.68

（174/224）（χ² = 8.998,

P = 0.003）

69.33（113/163） vs. 73.63

（148/201）（χ² = 0.823,

P = 0.364）

64.10（100/156） vs. 62.69

（121/193）（χ² = 0.074,

P = 0.786）

32.00（32/100） vs. 42.15

（51/121）（χ² = 2.405,

P = 0.121）

68.00（68/100） vs. 76.86（93/121）（χ² = 2.173,

P = 0.140）

OS⁃2组

72.53（235/324） vs. 78.24

（302/386）（χ² = 3.114,

P = 0.078）

75.10（193/257） vs. 77.38

（260/336）（χ² = 0.421,

P = 0.516）

71.02（174/245） vs. 68.77

（218/317）（χ² = 0.332,

P = 0.565）

31.03（54/174） vs. 35.78

（78/218）（χ² = 0.976,

P = 0.323）

78.74（137/174） vs. 74.31（162/218）（χ² = 1.046,

P = 0.306）

OS⁃3组

80.06（253/316） vs. 76.23

（279/366）（χ² = 1.453,

P = 0.228）

76.90（213/277） vs. 77.19

（247/320）（χ² = 0.007,

P = 0.933）

67.04（179/267） vs. 65.23

（197/302）（χ² = 0.207,

P = 0.649）

31.84（57/179） vs. 46.19

（91/197）（χ² = 8.090,

P = 0.004）

69.83（125/179） vs. 78.17（154/197）（χ² = 3.408,

P = 0.065）

OS⁃4组

83.18（178/214） vs. 80.65

（125/155）（χ² = 0.135,

P = 0.713）

87.70（164/187） vs. 81.82

（108/132）（χ² = 2.131,

P = 0.144）

69.14（121/175） vs. 72.00

（90/125）（χ² = 0.285,

P = 0.593）

26.45（32/121） vs. 40.00

（36/90）（χ² = 4.341,

P = 0.037）

81.82（99/121） vs. 76.67（69/90）（χ² = 0.845,

P = 0.358）

OS⁃5组

76.87（163/212） vs. 77.89

（222/285）（χ² = 0.038,

P = 0.846）

65.22（120/184） vs. 74.10

（186/251）（χ² = 4.019,

P = 0.045）

62.07（108/174） vs. 65.50

（150/229）（χ² = 0.506,

P = 0.477）

27.78（30/108） vs. 32.00

（48/150）（χ² = 0.531,

P = 0.466）

75.00（81/108） vs. 72.00（108/150）（χ² = 0.289,

P = 0.591）

OS⁃6组

77.71（129/166） vs. 77.13

（172/223）（χ² = 0.201,

P = 0.654）

76.22（109/143） vs. 73.23

（145/198）（χ² = 0.391,

P = 0.532）

57.89（77/133） vs. 63.04

（116/184）（χ² = 0.859,

P = 0.354）

38.96（30/77） vs. 43.97

（51/116）（χ² = 0.476,

P = 0.490）

71.43（55/77） vs. 71.55

（83/116）（χ² = 0.000,

P = 0.985）

表6

参考文献 23

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指标	序贯培养液（n = 259）	一步式培养液（n = 259）	χ²值	P值
授精卵子数	1 913	1 665	-	-
2PN胚胎卵裂率	97.57（1 438/1 474）	97.66（1 211/1 240）	0.814	0.367
Day 3优质胚胎率	73.63（1 094/1 486）	75.39（913/1 211）	0.168	0.682
Day 3可利用胚胎率	77.83（1 274/1 637）	75.91（1 087/1 432）	1.582	0.208
囊胚培养数	1 350	1 150	-	-
囊胚形成率	66.07（892/1 350）	66.00（759/1 150）	0.002	0.969
优质囊胚率	39.80（355/892）	31.36（238/759）	12.695	< 0.001
可利用囊胚率	75.00（669/892）	74.44（565/759）	0.068	0.794

项目	序贯培养液	一步式培养液	χ²值	P值
移植数	50	34
临床妊娠	32（64.00）	20（58.82）	0.2300	0.632
流产	4（8.00）	2（5.88）	0.1370	0.711

变量	单因素分析					多因素分析
变量	n	EventN	OR	95%CI	P值	n	EventN	OR	95%CI	P值
培养液类型
序贯培养液	892	350	-	-		892	350	-	-
一步式培养液	759	236	0.699	0.570 ~ 0.857	< 0.001	759	236	0.7	0.571 ~ 0.859	< 0.001
女方年龄	1 651	586	0.986	0.961 ~ 1.012	0.292	1 651	586	0.99	0.961 ~ 1.020	0.524
授精方式
ICSI	621	210	-	-		621	210	-	-
IVF	1 030	376	1.125	0.913 ~ 1.387	0.269	1 030	376	1.129	0.904 ~ 1.409	0.284
移植周期数	1 651	586	0.974	0.916 ~ 1.037	0.416	1 651	586	0.974	0.913 ~ 1.038	0.416
不孕类型
原发不孕	1 136	404	-	-		1 136	404	-	-
继发不孕	515	182	0.99	0.797 ~ 1.231	0.93	515	182	1.027	0.810 ~ 1.303	0.825
不孕年限	1 651	586	0.989	0.946 ~ 1.035	0.642	1 651	586	0.992	0.944 ~ 1.043	0.754

指标	序贯培养液（n = 259）	一步式培养液（n = 259）	χ²值	P值
2PN胚胎数	1 438	1 211	-	-
Day 3卵裂球融合率	3.55（51/1 438）	6.69（81/1 211）	13.708	< 0.001
≥ 10细胞	15.43（226/1 465）	14.36（181/1 260）	0.601	0.438
7 ~ 9细胞	47.85（701/1 465）	46.90（591/1 260）	0.243	0.622
1 ~ 6细胞	36.72（538/1 465）	36.59（461/1 260）	0.005	0.941

分组	序贯培养液	一步式培养液	χ²值	P值
OS-1组	3.48（7/201）	6.13（10/163）	1.422	0.233
OS-2组	2.68（9/336）	8.17（21/257）	9.147	0.002
OS-3组	4.06（13/320）	4.33（12/277）	0.027	0.870
OS-4组	7.58（10/132）	14.97（28/187）	4.035	0.045
OS-5组	3.19（8/251）	3.80（7/184）	0.121	0.727
OS-6组	2.02（4/198）	2.10（3/143）	0.002	0.960