实用医学杂志 ›› 2023, Vol. 39 ›› Issue (3): 303-308.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2023.03.007
二氧化硅通过调节人气道上皮细胞自噬促进 MUC5AC 表达
王孝芸1 唐红梅1 王星1 马宁1 李月蛟1 袁谢芳1 徐国锋1 张沄1,2
西南医科大学附属医院1 炎症与变态反应实验室,2 呼吸与危重症医学科(四川泸州 646000)
WANG Xiaoyun*,TANG Hongmei,WANG Xing,MA Ning,LI Yuejiao,YUAN Xiefang,XU Guofeng,ZHANG Yun.
Inflammation & Allergic Diseases Research Unit,Affiliated Hospital of Southwest Medical University,Luzhou 646000,China
摘要:
目的 探讨二氧化硅(SiO2)对人气道上皮细胞株(Beas⁃2b)黏蛋白5AC(MUC5AC)表达的影响 及其作用机制。方法 用含 10%胎牛血清的 DMEM 高糖培养基在 37 ℃和 5% CO2的培养箱培养 Beas⁃2b。 使用 NC⁃siRNA、ATG5⁃siRNA、BECN1⁃siRNA 及 mCherry⁃EGFP⁃LC3 等慢病毒转染 Beas⁃2b。各转染组细胞 用相应慢病毒(MOI = 20)转染 12 h 后换新鲜培养基,并用嘌呤霉素(1 μg/mL)进行筛选,获得稳定转 染细胞株。用 SiO2 (100 μg/mL)刺激前述稳定转染细胞株 24 h,并设 PBS 对照组。免疫荧光和免疫印 迹检测 MUC5AC、自噬相关蛋白 5(ATG5)、BECN1 和微管相关蛋白轻链 3(LC3)的蛋白水平;共聚焦显 微镜观察人气道上皮细胞自噬情况。结果 SiO2组的 MUC5AC、ATG5、BECN1 和 LC3 II 的表达高于对照 组(P < 0.05);ATG5 和 BECN1 敲减细胞株中,SiO2 刺激后 MUC5AC 和 LC3 II 的表达均低于对照组(P < 0.05)。结论 SiO2可通过调节人气道上皮细胞自噬促进 MUC5AC 表达,其作用机制与 ATG5 和 BECN1 信号途径相关。