实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (16): 2069-2074.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.16.007
青蒿琥酯对人Tenon囊成纤维细胞自噬的影响
陈静1 ，罗高权2 ，陈艺2
1 广州医科大学附属第三医院眼科（广州 510150）；2 中国人民解放军南部战区总医院（广州510010）
Effect of artesunate on autophagy in human tenon′ s capsule fibroblasts
CHEN Jing*，LUO Gaoquan， CHEN Yi.
Department of Ophthalmology，the Third Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University，Guang⁃ zhou 510150，China
摘要：
目的 观察青蒿琥酯（Art）对人 Tenon 囊成纤维细胞（HTFs）自噬的影响，探讨 Art 阻止 HTFs 增生机制。方法 体外培养 HTFs，实验分为空白对照组和不同浓度（50、100、150、200 μg/mL）Art 实验组， 给药24 h和48 h后噻唑蓝（MTT）法检测HTFs活性。48 h后采用逆转录定量PCR（qRT⁃PCR）和蛋白免疫印 迹（Western Blot）法检测微管相关蛋白1轻链3（LC3）⁃II、自噬相关蛋白Beclin⁃l mRNA 和蛋白的相对表达水平。选用 150 μg/mL Art 处理 HTFs 48 h，采用 Cyto⁃ID 染色法检测 HTFs 自噬水平，对 Cyto⁃ID 染色阳性的细 胞数量进行检测，并与空白对照组进行比较。结果 MTT 法结果显示：Art 抑制HTFs 增殖（均P < 0.05），且存在一定的浓度和时间依赖性，随着浓度升高和时间延长，其抑制率由 4.7%增至 68.6%。qRT⁃PCR 法结果 显示：不同浓度 Art 作用 48 h 后，LC3⁃II 和 Beclin⁃l mRNA 的相对表达量增加，分别从（1.367 ± 0.214）升至 （4.765 ± 0.371），（1.235 ± 0.164）升至（3.487 ± 0.356），各组间差异均有统计学意义（FL = 20.920，P < 0.01； FB = 26.370，P < 0.01）。Western Blot 结果显示：不同浓度Art 作用48 h后，LC3⁃II 和Beclin⁃l 蛋白的相对表达 量增加，分别从（0.101 ± 0.025）升至（0.808 ± 0.102），（0.098 ± 0.036）升至（0.784 ± 0.064），各组间差异均有 统计学意义（FL =32.852，P < 0.01；FB = 29.874，P < 0.01）。Cyto⁃ID 染色结果显示：150 μg/mL Art 作用 48 h 后，HTFs 自噬阳性细胞的比例由空白对照组的（13.302 ± 2.301）%上升至（53.274 ± 7.851）%，差异有统计学 意义（t = 8.804，P < 0.01）。结论 Art有效促进HTFs中LC3⁃II、Beclin⁃l mRNA和蛋白的表达，提高细胞自噬 水平，抑制细胞增殖。
