实用医学杂志 ›› 2022, Vol. 38 ›› Issue (3): 288-294.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2022.03.006
大肠埃希菌密度感应调节子qseC 基因失活突变株构建及其生物学特性
周青帅1 赵行行1 李冬梅1 崔古贞2 陈峥宏2 任玮3 齐晓岚1 洪伟1
贵州医科大学1地方病与少数民族疾病教育部重点实验室 & 贵州省医学分子生物学重点实验室,2贵州省普通高等学校病原生物学特色重点实验室,3免疫学教研室(贵阳550004)
Construction of quorum sensing regulator C gene inactivation mutant of Escherichia coli and its biological characteristics
ZHOU Qingshuai*,ZHAO Xingxing,LI Dongmei,CUI Guzhen,CHEN Zhenghong,REN Wei, QI Xiaolan,HONG Wei.
Key Laboratory of Ministry of Education for Endemic and Ethnic Diseases & Key Laboratory of Medical Molecular Biology of Guizhou Province,Guizhou Medical University,Guiyang 550004,China
摘要:
目的 密度感应系统与细菌生长状态、毒力改变、生物膜形成、运动能力改变以及参与细菌和宿主的免疫反应和对药物的抗性等相关。大肠埃希菌密度调节子 C(Escherichia coli quorum sensingregulator C,qseC)是其密度感应系统的受体,探究其对大肠埃希菌生理、生化特征的影响。方法 使用嗜热二型内含子基因打靶系统(Thermotargetron)构建大肠埃希菌 HMS174 菌株 qseC 基因失活突变株,测定其生长速率、溶血能力、生物膜形成和运动能力等表型的变化,以及对酸碱和 6 种抗生素的敏感性。结果 成功构建了大肠埃希菌 HMS174 qseC627s 位点的打靶载体,该载体基因失活效率为 100%。对比大肠埃希菌 HMS174 与 ΔqseC627s 突变株的表型发现,突变株生长速率和最大生物量降低、溶血能力丧失、生物膜形成能力降低、运动能力减弱、对酸、碱的耐受能力降低。抗生素敏感性测定结果表明,ΔqseC627s 对氯霉素、氨苄青霉素、四环素、阿莫西林、甲硝唑耐受性降低。结论 大肠埃希菌 HMS174 中 qseC 基因缺失后,突变株表型和对抗外界压力因素发生了显著改变。