实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (23): 2984-2988.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.23.005
miR⁃140⁃5p通过调节自噬影响结直肠癌细胞对奥沙利铂的敏感性
延飞飞 李宏武
中国医科大学附属第四医院普外科（沈阳 110032）
MicroRNA ⁃140⁃5p affects the sensitivity of colorectal cancer cells to oxaliplatin by regulating autophagy
YAN Feifei，LI Hongwu.
Department of General Surgery，the Fourth Affiliated Hospital of China Medical University， Shenyang 110032，China
摘要：
目的 探讨 miR⁃140⁃5p 对结直肠癌（CRC）细胞自噬的调控及对奥沙利铂敏感性的影响。 方法 采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应（RT⁃qPCR）检测 30 例 CRC 组织与相应癌旁组织中 miR⁃ 140⁃5p mRNA 的表达水平，并检测 miR⁃140⁃5p mRNA 在 CRC 细胞系及正常结直肠细胞系中的表达情况。 通过 miR⁃140⁃5p mimics 转染 CRC 细胞 HCT 116，RT⁃qPCR 检测转染效率；细胞计数试剂（CCK⁃8）法检测转 染组和对照组在奥沙利铂处理下的细胞活性；蛋白质印迹法（Western blot）检测微管相关蛋白轻链 3（LC3） 的表达；免疫荧光检测 LC3 荧光斑点的表达。转染 miR⁃140⁃5p mimics 并共处理自噬激活剂雷帕霉素后， CCK⁃8 法检测共处理组和单独转染 miR⁃140⁃5p mimics 组 CRC 细胞对奥沙利铂的敏感性；克隆形成实验检 测 CRC 细胞增殖水平。结果 miR⁃140⁃5p 在 CRC 组织和 CRC 细胞系中的表达分别低于相应癌旁组织和 正常结直肠细胞系，差异有统计学意义（P < 0.05）。CCK⁃8 结果表明，过表达 miR⁃140⁃5p 促进 CRC 细胞对 奥沙利铂的敏感性（P < 0.05）；Western blot 表明过表达 miR⁃140⁃5p 促进自 LC3II/I 表达水平降低，免疫荧 光表明过表达 miR⁃140⁃5p 抑制 LC3 荧光斑点表达（P < 0.05）。过表达 miR⁃140⁃5p 与雷帕霉素共处理后， CCK⁃8 表明与单独转染 miR⁃140⁃5p mimics 组相比，共处理组细胞对奥沙利铂敏感性降低；克隆形成实验表 明共处理组细胞增殖水平相对增加。结论 CRC 组织和 CRC 细胞系中 miR⁃140⁃5p 的表达分别低于相应 癌旁组织和正常结直肠细胞系，miR⁃140⁃5p 通过抑制自噬促进了 CRC 细胞对奥沙利铂的敏感性，可能为 CRC 的靶向治疗提供一定的策略。
