实用医学杂志 ›› 2023, Vol. 39 ›› Issue (6): 672-678.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2023.06.004
张卓尔1 高筱雅2 余娟3 王玉理3
1 南方医科大学第二临床医学院(广州 510515);2 南方医科大学珠江医院神经内科(广州510282); 3 深圳市第二人民医院医学影像科(广东深圳518000)
Experimental study of lncRNA KCNQ1OT1 targeting miR⁃129⁃5p to regulate inflammation and apoptosis in a Parkinson′s disease cell model
ZHANG Zhuoer*,GAO Xiaoya*,YU Juan,WANG Yuli.
The Second Clini⁃ cal Medical College of Southern Medical University,Guangzhou 510515,China
摘要:
目的 探讨 lncRNA KCNQ1OT1 靶向 miR⁃129⁃5p 调控帕金森病(PD)细胞模型炎症和细胞凋亡的机制。方法 体外培养人 SK⁃N⁃SH 细胞,用 1、2、4 mmol/L MPP+ 处理 SK⁃N⁃SH 构建PD细胞损伤模 型。将si⁃NC、si⁃lncRNA KCNQ1OT1、miR⁃NC、miR⁃129⁃5p、si⁃lncRNA KCNQ1OT1与anti⁃miR⁃NC、si⁃lncRNA KCNQ1OT1与anti⁃miR⁃129⁃5p分别转染至MPP+处理SK⁃N⁃SH构建PD细胞中,记为si⁃NC+MPP+组、si⁃lncRNA KCNQ1OT1+MPP+组、miR⁃NC+MPP+组、miR⁃129⁃5p+MPP+组、si⁃lncRNA KCNQ1OT1+anti⁃miR⁃NC+MPP+组、si-lncRNA KCNQ1OT1+anti⁃miR⁃129⁃5p+MPP+组。酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞 TNF⁃α、IL⁃6、IFN⁃γ 水平;实时荧光定量 PCR(RT⁃qPCR)检测细胞lncRNA KCNQ1OT1和miR⁃129⁃5p表达情况;双荧光素酶报告 实验检测 lncRNA KCNQ1OT1 和 miR⁃129⁃5p 的靶向关系。结果 与 NC 组比较,1、2、4 mmol/L MPP+ 组细胞 凋亡率、Cleaved⁃caspase⁃3 蛋白表达、TNF⁃α、IL⁃6、IFN⁃γ 水平显著升高(P < 0.05)。与 NC 组比较,1、2、 4 mmol/L MPP+ 组细胞lncRNA KCNQ1OT1表达,其水平明显较高,而miR⁃129⁃5p表达,明显更低(P < 0.05)。 与si⁃NC+MPP+ 组比较,si⁃lncRNA KCNQ1OT1+MPP+组细胞凋亡率、Cleaved⁃caspase⁃3蛋白表达、TNF⁃α、IL⁃6、 IFN⁃γ水平显著降低(P < 0.05)。与miR⁃NC+MPP+组比较,miR⁃129⁃5p+MPP+组细胞凋亡率、Cleaved⁃caspase⁃3 蛋白表达、TNF⁃α、IL⁃6、IFN⁃γ水平显著降低(P < 0.05)。si⁃lncRNA KCNQ1OT1+anti⁃miR⁃129⁃5p+MPP+ 细胞 凋亡、Cleaved⁃caspase⁃3 蛋白表达、TNF⁃α、IL⁃6、IFN⁃γ 水平显著升高(P < 0.05)。结论 lncRNA KCNQ1OT1 下调miR⁃129⁃5p表达抑制PD 细胞模型炎症和细胞凋亡。