实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (5): 579-584.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.05.005
翟金海, 张佳怡, 徐速
1 江苏医药职业学院医学院(江苏盐城 224008);2 南京中医药大学第一临床医学院(南京 210001); 3 南京中医药大学附属盐城市中医院(江苏盐城 224001)
Effect of platelet activation on angiogenesis of intestinal microvascular endothelial cells
ZHAI Jinhai, ZHANG Jiayi,XU Su
Clinical Faculty of Jiangsu Vocational College of Medicine,Yancheng 224008,China
摘要:
目的 研究活化血小板诱导的血管生成对肠微血管内皮细胞(Intestinal microvascular endo⁃thelial cells,IMECs)上皮间质转化(epithelial⁃mesenchymal transition,EMT)的影响及机制。方法 将IMECs细胞作为研究对象,以活化的血小板刺激,观察比较加入PI3K/mTOR抑制剂BEZ235前后,IMECs细胞迁移、管腔形成能力的变化来研究活化的血小板对IMECs 血管生成的影响,观察对 PI3K/AKT/mTOR信号通路磷酸化相关蛋白及HIF⁃1α的蛋白表达的影响,以及对纤维化相关因子E⁃cadherin、α⁃SMA、Collagen I 蛋白表达变化和基因表达水平的影响。结果 经培养得到的IMECs经倒置显微镜形态学特征鉴定95%以上为内皮细胞特征。静息血小板加入ADP后,FCM检测P⁃selectin 抗体浓度明显增加(P<0.01),表明活化血小板数量明显增加。加入PI3K/mTOR抑制剂BEZ235可显著抑制活化的血小板刺激增强了IMECs的细胞迁移能力、管腔形成的能力(P<0.01)。PI3K/AKT/mTOR蛋白无明显变化(P<0.05),而磷酸化蛋白水平明显受到抑制,HIF⁃1α、α⁃SMA、CollagenI的蛋白生成及基因表达明显受到抑制(P<0.01),而E⁃cadherin蛋白生成及基因表达则上调(P<0.01)。结论 活化血小板诱导的IMECs细胞EMT的机制可能是通过PI3K/mTOR/AKT信号通路促进血管生成实现的。