沙棘熊果酸对大鼠坐骨神经损伤修复作用

doi:10.3969/j.issn.1006-5725.2023.24.002

摘要/Abstract

摘要：

目的探讨沙棘熊果酸对大鼠坐骨神经损伤的修复作用。方法 2月龄Wistar大鼠30只，坐骨神经损伤模型制备后随机分为熊果酸组和对照组，每组15只。熊果酸组以熊果酸150 mg/（kg·d）灌胃，对照组给予同样剂量的生理盐水，连续灌胃6周。6周后，H&E染色法观察大鼠坐骨神经病理学变化，并计算大鼠SFI、MNCV；免疫组织化学法检测坐骨神经组织NGF的表达，蛋白免疫印迹法检测L₄ ~ L₆脊髓中GAP-43的表达情况。结果术后6周后，与对照组相比，熊果酸组再生神经纤维数目有所增多，排列相对规则，毛细血管结构丰富，增生的成纤维细胞减少；SFI和MNCV%明显增高（P < 0.05），NGF蛋白阳性表达显著增高（P < 0.05），坐骨神经组织中GAP-43的蛋白表达量明显上升（P < 0.05）。结论沙棘熊果酸干预能够使大鼠坐骨神经损伤后功能得到改善，这可能与增加大鼠NGF蛋白阳性的表达，提高GAP-43蛋白的表达水平有关。

关键词: 沙棘熊果酸, 大鼠, 坐骨神经, 损伤, 修复作用

Abstract:

Objective To investigate the repairing effect of ursolic acid extracted from Hippophae rhamnoides L. on sciatic nerve injury in rats. Methods After preparing a sciatic nerve damage model， thirty 2-month old Wistar rats were randomly divided into ursolic acid and control groups， with 15 rats in each group. Ursolic acid group was given Ursolic acid 150 mg/（kg·d） by gavage， while the control group was given the same dose of normal saline for 6 weeks. After 6 weeks， H&E staining was used to observe the pathological changes of rat sciatic nerves， and SFI and MNCV were calculated； The expression of NGF in sciatic nerve was detected by immunohistochemistry， and the expression of GAP-43 in L4-L6 spinal cord was detected by Western blotting. Results After 6 weeks， compared to the control group， the number of regenerated nerve fibers in the ursolic acid group increased， the arrangement was slightly regular， the capillary structure was abundant， and the proliferation of fibroblasts decreased； SFI and MNCV% were significantly increased （P < 0.05）， NGF protein positive expression was significantly increased （P < 0.05）， and the difference was statistically significant （P < 0.05）. GAP-43 protein expression in sciatic nerve tissue was significantly increased （P < 0.05）. Conclusions The intervention of ursolic acid extracted from Hippophae rhamnoides L. can improve the function of rats after sciatic nerve injury， promote the increase of regenerated nerve fibers and the repair of myelin sheath in rats with sciatic nerve injury， which may be related to increased NGF and GAP-43 protein expression in rats.

Key words: ursolic acid extracted from Hippophae rhamnoides L., rats, sciatic nerve, injury, repair effect

中图分类号:

孙悦,戈娜,赵雪,郭腾飞,刘嘉炜,张文龙,周朋. 沙棘熊果酸对大鼠坐骨神经损伤修复作用[J]. 实用医学杂志, 2023, 39(24): 3158-3162.

Yue SUN,Na GE,Xue ZHAO,Tengfei GUO,Jiawei LIU,Wenlong ZHANG,Peng. ZHOU. Effect of ursolic acid extracted from Hippophae Rhamnoides L. on repair of sciatic nerve injury in rats[J]. The Journal of Practical Medicine, 2023, 39(24): 3158-3162.

图/表 5

图1

表1

图2

表2

图3

参考文献 23

1	MAAK T G， OSEI D， DELOS D， et al. Peripheral Nerve Injuries in Sports-related Surgery： Presentation， Evaluation， and Management： AAOS Exhibit Selection ［J］. J Bone Joint Surg Am， 2012， 94（16）： e1211-1210.
2	WELCH J A. Peripheral Nerve Injury ［J］. Semin Vet Med Surg Small Anim， 1996， 11（4）： 273-284.
3	SASSO L L， DE SOUZA L G， GIRASOL C E， et al. Photobiomodulation in Sciatic Nerve Crush Injuries in Rodents： A Systematic Review of the Literature and Perspectives for Clinical Treatment ［J］. J Lasers Med Sci， 2020， 11（3）： 332-344.
4	SAYAD-FATHI S， NASIRI E， ZAMINY A. Advances in Stem Cell Treatment for Sciatic Nerve Injury ［J］. Expert Opin Biol Ther， 2019， 19（4）： 301-311.
5	GONG Y， ZHANG X， HE L， ET A L. Optimization of Subcritical Water Extraction Parameters of Antioxidant Polyphenols from Sea Buckthorn （Hippophae Rhamnoides L.） Seed Residue ［J］. J Food Sci Technol， 2015， 52（3）： 1534-1542.
6	杨桂珍，李玉香，陈健茂，等. 沙棘原花青素对6月龄糖尿病大鼠周围神经病变的保护作用及其机制［J］. 时珍国医国药， 2011， 22（7）： 1593-1595.
7	SEO D Y， LEE S R， HEO J W， et al. Ursolic Acid in Health and Disease ［J］. Korean J Physiol Pharmacol， 2018， 22（3）： 235-248.
8	BHAT R A， LINGARAJU M C， PATHAK N N， et al. Effect of Ursolic Acid in Attenuating Chronic Constriction Injury-induced Neuropathic Pain in Rats ［J］. Fundam Clin Pharmacol， 2016， 30（6）： 517-528.
9	沈宁江，朱家恺. 评价坐骨神经功能的实验研究［J］. 中国矫形外科杂志， 1995， 2（3）： 191-193.
10	苏静，凌春燕，雷龙鸣. 坐骨神经损伤实验动物的建模及评价方法与指标［J］. 中国组织工程研究， 2021， 25（26）： 4186-4191.
11	WANG G， WANG Z， GAO S， et al. Curcumin Enhances the Proliferation and Myelinization of Schwann Cells through Runx2 to Repair Sciatic Nerve Injury ［J］. Neurosci Lett， 2022， 770：136391.
12	DE ALMEIDA MELO MACIEL MANGUEIRA M， CAPARELLI-DÁQUER E， FILHO O P G， et al. Raman Spectroscopy and Sciatic Functional index （SFI） After Low-level Laser Therapy （LLLT） in a Rat Sciatic Nerve Crush Injury Model ［J］. Lasers Med Sci， 2022， 37（7）： 2957-2971.
13	CHEN J， LI C， LIU W， et al. miRNA-155 Silencing Reduces Sciatic Nerve Injury in Diabetic Peripheral Neuropathy ［J］. J Mol Endocrinol， 2019， 63（3）： 227-238.
14	鲁义，姚嘉茵，王保，等. 龙胆苦苷对糖尿病周围神经痛大鼠神经保护作用［J］. 实用医学杂志，2020， 36（5）： 565-569.
15	王阳阳，黄霄云，冯茂胜. 柴胡疏肝散对糖尿病周围神经病变大鼠瞬时受体电位香草酸亚型1/降钙素基因相关肽通路及坐骨神经电生理变化的影响［J］. 安徽医药，2023， 27（7）： 1312-1317，1485.
16	LI Z， WANG W， MENG F， et al. Analgesic and Neuroprotective Effects of Baimai Ointment on Diabetic Peripheral Neuropathy ［J］. J Ethnopharmacol， 2022， 292：115122.
17	HEUMANN R， KORSCHING S， BANDTLOW C， et al. Changes of Nerve Growth Factor Synthesis in Nonneuronal Cells in Response to Sciatic Nerve Transection ［J］. J Cell Biol， 1987， 104（6）： 1623-1631.
18	BOHMWALD K， ANDRADE C A， MORA V P， et al. Neurotrophin Signaling Impairment by Viral Infections in the Central Nervous System ［J］. Int J Mol Sci， 2022， 23（10）： 5817.
19	KHUDAIR A， SHABAA S H. Histological Effect of Ursolic Acid， Hyperinsulinemia and Vitamin B Complex on Sciatic Nerve Repair and Lipid Profile of Alloxan induced Diabetic Rabbits［J］. J Membr Biol， 2018， 26（5）：193-203.
20	MAHALIK T J， CARRIER A， OWENS G P， et al. The Expression of GAP43 mRNA during the Late Embryonic and Early Postnatal Development of the CNS of the Rat： An in Situ Hybridization Sudy ［J］. Brain Res Dev Brain Res， 1992， 67（1）： 75-83.
21	李婉媚，杨旭斌，黄懿文，等. 血糖波动对糖尿病大鼠心脏自主神经功能的影响及其机制［J］.实用医学杂志， 2021， 37（16）： 2065-2068，2074.
22	TOLNER E A， VAN VLIET E A， HOLTMAAT A J， et al. GAP-43 mRNA and Protein Expression in the Hippocampal and Parahippocampal Region during the Course of Epileptogenesis in Rats ［J］. Eur J Neurosci， 2003， 17（11）： 2369-2380.
23	LU J， ZHENG Y L， WU D M， et al. Ursolic Acid Ameliorates Cognition Deficits and Attenuates Oxidative Damage in the Brain of Senescent Mice Induced by D-galactose ［J］. Biochem Pharmacol， 2007， 74（7）： 1078-1090.

组别	SFI	MNCV（m/s）
熊果酸组	-40.02 ± 4.20	43.01 ± 4.23
对照组	-55.12 ± 8.57	27.02 ± 2.98
t值	5.00	9.78
P值	< 0.01	< 0.01

组别	NGF表达染色密度	NGF表达染色面积
熊果酸组	125.08 ± 14.22	87.01 ± 10.57
对照组	97.09 ± 11.82	55.18 ± 6.92
t值	4.79	7.97
P值	< 0.01	< 0.01

[1]	杨俊,刘兆锋,谢思远,覃汉俊,朱煜华,吴珺. TA-siRNA纳米凝胶靶向抑制PNI施万细胞Gzmb基因表达促进神经修复[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(8): 1101-1107.
[2]	黄挺,谢榕城,王雨婷,林小明,马杰飞. 肾阻力指数联合血液和尿液生物标志物早期预测介入术后造影剂诱导的急性肾损伤的价值[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(7): 1011-1016.
[3]	肖凌,高春蕾,郭伟,王宁,张萱,刘明. 党参多糖通过调控MAPK/NF-κB信号通路对脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠肺组织的保护作用[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(7): 948-954.
[4]	王加栋,黄方舟,黄艳,陈管雄,刘军,黄佩琦. Eupatilin通过Sesn2-Nrf2保护线粒体功能在脓毒症脑损伤中的作用[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(5): 601-607.
[5]	吴超瑜,欧阳奕安,薛正彪,赖纪英,欧阳松茂,王树生,苏子慧,朱宏泉. 基于磁共振波谱分析评估高频重复经颅磁刺激治疗脑损伤后慢性意识障碍患者的促醒疗效[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(4): 554-560.
[6]	戴成才,程振兴,涂倩倩. 血清胱抑素C联合床旁肾脏超声对脓毒症急性肾损伤患者预后情况的评估价值[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(22): 3226-3231.
[7]	黄坤源,江克华,王庆. S100A9在肾脏疾病中的研究进展[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(22): 3251-3255.
[8]	罗世君,张丽姿,陈敦金. 重视非创伤性因素的胎盘植入性疾病的识别和防治[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(21): 2971-2975.
[9]	黄瑜亮,汤颖,余文娟,陈俊哲. Cyclin D1通过促进糖酵解改善肾脏缺血再灌注诱导的急性肾损伤的机制[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(21): 3013-3022.
[10]	武周游,李婷,张腾伟,房巧燕,杨刘,黎巧. 羟基壬烯醛通过抑制内皮细胞焦亡减轻新生儿脓毒症诱导的急性肺损伤[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(2): 195-201.
[11]	唐立丽,王昕宇,张杰,赵悦,李小悦. m6A甲基化修饰在急性肾损伤中的研究进展[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(2): 278-282.
[12]	陶颖俊,任腾竹,魏峰,刘新通. 阿加曲班联合线粒体移植对脑缺血再灌注损伤小鼠内皮功能及血流变学的影响[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(19): 2665-2671.
[13]	陈洋洋,马鸿琦,杨静,吴宗跃,朱萍. 苍术素调节CXCL12/CXCR4信号通路对哮喘幼年大鼠肺组织损伤的影响[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(19): 2672-2677.
[14]	王之仕,李桂凌,陈劲果,王宏. miR-223通过调控Keap1/Nrf2/ARE信号通路对前列腺癌细胞损伤的影响[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(17): 2375-2380.
[15]	刘敏,陈喜云,吕建磊,冯洁. ALKBH5通过TRAF1/NF⁃κB通路减轻脓毒症心肌损伤的机制[J]. 实用医学杂志, 2024, 40(17): 2381-2389.