实用医学杂志 ›› 2023, Vol. 39 ›› Issue (5): 557-563.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2023.05.006
王韵 宋姗 彭斐 胡文霞
河北医科大学第四医院 呼吸内科(石家庄 050011)
LncRNA SNHG15 regulates cisplatin sensitivity and epithelial ⁃ mesenchymal transition in non ⁃ small cell lung cancer cells through miR⁃483⁃3p/DDIT4 axis
WANG Yun,SONG Shan,PENG Fei,HU Wenxia.
Depart⁃ ment of Respiratory Medicine,the Fourth Hospital,Hebei Medical University,Shijiazhuang 050011,China
摘要:
目的 探究 LncRNA SNHG15 对非小细胞肺癌(NSCLC)细胞的顺铂(DDP)敏感性和上皮间 质转化的影响以及 miR⁃483⁃3p/DNA 损伤诱导转录物 4(DDIT4)轴在其中发挥的作用。方法 体外培养 NSCLC 细胞(A549)、NSCLC 耐药细胞(A549/DDP),检测两种细胞对 DDP 的 IC50 及 LncRNA SNHG15、 miR⁃483⁃3p、DDIT4 mRNA 与蛋白表达,将 A549/DDP 细胞随机分为 A549/DDP 组、si NC 组、si SNHG15 组、 si SNHG15+inhibitor NC 组、si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor 组、si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor+si NC 组、 si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor+si DDIT4 组;蛋白印迹分析法检测各组细胞 E⁃cad、N⁃cad、DDIT4 蛋白表达 变化;双荧光素酶报告实验验证 miR⁃483⁃3p 与 LncRNA SNHG15、DDIT4 的靶向关系。结果 与 A549 细胞相比,A549/DDP 细胞对 DDP 的 IC50、LncRNA SNHG15、DDIT4 mRNA 与蛋白升高,miR⁃483⁃3p 水平降低(P < 0.05);A549/DDP 组细胞间黏附明显被破坏;si SNHG15 组、si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor+si DDIT4 组细 胞排列相对紧密,呈现上皮细胞特性;si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor组较si SNHG15组细胞排列松散、扩散细胞多;与 A549/DDP 组相比,si SNHG15 组 A549/DDP 细胞增殖抑制率、E⁃cad 表达升高,侵袭细胞数、迁移 细胞数、N⁃cad、DDIT4 表达降低(P < 0.05);与 si SNHG15 组相比,si SNHG15+miR⁃483⁃3p inhibitor 组 A549/ DDP 细胞增殖抑制率、E⁃cad 表达降低,侵袭细胞数、迁移细胞数、N⁃cad、DDIT4 表达升高(P < 0.05)。结论 沉默 A549/DDP 细胞中 SNHG15 表达可通过调控 miR⁃483⁃3p/DDIT4,抑制 A549/DDP 细胞增殖、侵袭、迁移、 EMT,并降低A549/DDP 细胞对DDP 的耐药性。