实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (24): 3119-3125.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.24.005
桦木酸在缺氧条件下对PC⁃3细胞干性、侵袭、迁移、黏附及HIF⁃1α表达的影响
谢尚延1 黄帅1 王斌2 林卓远3 钟少文1 梁宝霞4
广州医科大学附属第二医院1 骨科,2 急诊外科,3 泌尿外科,4 放射科(广州 510260)
Effects of Betulinic acid on stemness,invasion,migration,adhesion and HIF⁃1α expression in PC⁃3 cells under hypoxia
XIE Shangyan*,HUANG Shuai,WANG Bin,LIN Zhuoyuan,ZHONG Shaowen,LIANG Baoxia.
Department of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University,Guangzhou 510260, China
摘要:
目的 探讨桦木酸(betulinic acid,BA)在缺氧条件下对人前列腺癌骨转移 PC⁃3 细胞干性、 侵袭、迁移、黏附及缺氧诱导因子⁃1α(hypoxia⁃inducible factor⁃1α,HIF⁃1α)表达的影响。方法 采用 CCK⁃8 检测 BA 对前列腺癌骨转移细胞株 PC⁃3 细胞活力半数抑制浓度(IC50),再分为 IC50药物浓度 BA 组和对照 组,检测 BA 对 PC⁃3 细胞增殖的影响;在常氧、缺氧及缺氧+IC50(10 μmol/L)BA 条件下处理 PC⁃3 细胞,采用 Transwell 实验检测 BA 对细胞侵袭、迁移能力的影响;采用细胞黏附实验检测 BA 对细胞黏附能力的影响; 采用肿瘤成球实验检测 BA 对细胞自我更新能力影响;采用 PCR 实验及 Western blot 实验检测 BA 对细胞表 达 HIF⁃1α、CD31、CD44 的影响;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测 BA 对细胞 VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6 和 TNF⁃α 因子表达的影响。结果 BA 呈浓度和时间依赖性抑制 PC⁃3 细胞增殖,其 IC50为 10 μmol/L。PC⁃3 细胞在缺氧环境中的干性、侵袭、迁移、黏附能力增加,而加入 BA 后 PC⁃3 细胞的干性、侵袭、迁移、黏附 能力下降。Western blot 实验结果显示,BA 能抑制 PC⁃3 细胞中 HIF⁃1α 蛋白表达,同时抑制 CD31、CD44 蛋 白表达(P < 0.01);PCR 实验结果显示,BA 下调 HIF⁃1α 的 mRNA 表达,同时也下调 CD31、CD44 的 mRNA 表达(P < 0.01)。ELISA 试验结果显示 BA 可抑制 VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6 和 TNF⁃α 因子的表达(P < 0.01)。 结论 BA 能抑制缺氧条件下 PC⁃3 细胞的干性、侵袭、迁移及黏附能力,其机制可能与 BA 下调 HIF⁃1α、 CD31、CD44表达,及抑制VEGF、IL⁃8、IL⁃1β、IL⁃6和TNF⁃α 等因子表达有关