神经前体细胞表达发育下调样蛋白4调控Wnt/β-catenin通路对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响
收稿日期: 2026-03-24
网络出版日期: 2026-08-05
基金资助
贵州省科技厅基础研究计划项目(黔科合基础MS〔2025〕452);贵州医科大学慢性疾病标志物研究重点实验室项目（编号：校重点实验室［2024］fy004号）
Effect of NEDD4L on proliferation and apoptosis of acute myeloid leukemia cells via the Wnt/β-catenin pathway
Received date: 2026-03-24
Online published: 2026-08-05
目的 探讨神经前体细胞表达发育下调样蛋白4（NEDD4L）调控Wnt/β-catenin通路对急性髓系白血病（AML）细胞增殖和凋亡的影响。 方法 利用慢病毒转染技术构建稳定过表达及敲低NEDD4L的Kasumi-1和U937细胞系；通过RT-qPCR和Western blot验证NEDD4L过表达及敲低效率；CCK-8实验检测Kasumi-1和U937细胞的增殖情况；流式细胞术检测Kasumi-1和U937细胞凋亡改变；Western blot检测凋亡蛋白BAX、Bcl2及Wnt/β-catenin通路中关键蛋白β-catenin、c-Myc、cyclin D1的表达。 结果 RT-qPCR和Western blot结果提示，Kasumi-1和U937细胞系中NEDD4L成功过表达和敲低（P < 0.05）。CCK-8结果提示NEDD4L过表达显著抑制Kasumi-1和U937细胞增殖能力（P < 0.05）。流式细胞术结果表明，NEDD4L过表达后Kasumi-1和U937细胞凋亡率显著升高。Western blot结果提示，过表达NEDD4L可上调凋亡蛋白BAX、下调抗凋亡蛋白Bcl2表达（P < 0.05）。机制研究表明，过表达NEDD4L可降低β-catenin、c-Myc、cyclin D1的表达，而敲低NEDD4L则上调上述蛋白。此外，Wnt/β-catenin通路激动剂SKL2001可部分逆转过表达NEDD4L所致的通路抑制效应（P < 0.05）。 结论 NEDD4L通过抑制Wnt/β-catenin通路活性，从而抑制AML细胞增殖、诱导AML细胞凋亡。提示NEDD4L可能是AML潜在的治疗靶点。
关键词： 神经前体细胞表达发育下调样蛋白4; Wnt/β-catenin通路; 急性髓系白血病; 细胞增殖; 细胞凋亡
刘远程 , 胡承龙 , 周武 , 张静馨 , 张清琳 , 胡华丽 , 韦四喜 . 神经前体细胞表达发育下调样蛋白4调控Wnt/β-catenin通路对急性髓系白血病细胞增殖和凋亡的影响[J]. 实用医学杂志, 2026 , 42(14) : 2533 -2541 . DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2026.14.006
Objective To investigate the effect of NEDD4L on the proliferation and apoptosis of acute myeloid leukemia （AML） cells and its underlying mechanism via the regulation of the Wnt/β-catenin pathway. Methods Stable NEDD4L-overexpressing and NEDD4L-knockdown Kasumi-1 and U937 cell lines were successfully established via lentiviral transduction technology. The efficiency of NEDD4L overexpression and knockdown was rigorously verified by RT-qPCR and Western blot. Cell proliferation was accurately assessed using the CCK-8 assay， and apoptosis was precisely detected through flow cytometry. The expression levels of the apoptosis-related proteins BAX and Bcl2， along with the key proteins of the Wnt/β-catenin pathway （β-catenin， c-Myc， and cyclin D1）， were measured by Western blot. Results Results from RT-qPCR and Western blot assays demonstrated that NEDD4L was successfully overexpressed and knocked down in Kasumi-1 and U937 cell lines （P < 0.05）. CCK-8 assay results indicated that overexpression of NEDD4L significantly inhibited the proliferative capacity of Kasumi-1 and U937 cells （P < 0.05）. Flow cytometry results showed that overexpression of NEDD4L significantly increased the apoptosis rate in Kasumi-1 and U937 cells. Western blot analysis results revealed that overexpression of NEDD4L upregulated the pro-apoptotic protein BAX and downregulated the anti-apoptotic protein Bcl2 （P < 0.05）. Mechanistic studies results showed that overexpression of NEDD4L decreased the expression of β-catenin， c-Myc， and cyclin D1， whereas knockdown of NEDD4L upregulated these proteins. Furthermore， the Wnt/β-catenin pathway agonist SKL2001 partially reversed the pathway inhibition induced by overexpression of NEDD4L （P < 0.05）. Conclusion NEDD4L inhibits the proliferation of AML cells and induces the apoptosis of AML cells by suppressing the activity of the Wnt/β-catenin pathway， which suggests that NEDD4L may serve as a potential therapeutic target for AML.
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