收稿日期: 2023-07-03
网络出版日期: 2024-08-26
基金资助
广东省医学科研基金项目(B2019007)
MiR⁃365a⁃3p affects vascular endothelial cell function through TGF⁃β signaling pathway and participates in the pathogenesis of preeclampsia
Received date: 2023-07-03
Online published: 2024-08-26
目的 探究微小RNA（miRNA）-365a-3p影响血管内皮细胞功能参与子痫前期（PE）的发病机制。 方法 分离原代人脐静脉内皮细胞（HUVECs），设为NC组（转染miR-365a-3p NC）、mimics组（转染miR-365a-3p mimics）、inhibitor组（转染miR-365a-3p inhibitor），另取对数期细胞设为空白组。检测各组增殖、迁移及血管形成能力。双荧光素酶实验验证miR-365a-3p与下游基因的靶向关系。检测各组TGF-β1、Smad4、Smad7蛋白表达。 结果 与空白组、NC组比较，mimics组24、48、72 h吸光度值及迁移率降低（P < 0.05），每个视野的管状结构数量减少（P < 0.05），inhibitor组24、48、72 h吸光度值及迁移率升高（P < 0.05），每个视野的管状结构数量增加（P < 0.05）。双荧光素酶实验表明Smad7是miR-365a-3p的一个靶基因。与空白组、NC组比较，mimics组转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad4蛋白表达升高（P < 0.05），Smad7蛋白表达降低（P < 0.05），inhibitor组TGF-β1、Smad4蛋白表达降低（P < 0.05），Smad7蛋白表达升高（P < 0.05）。 结论 miR-365a-3p可能通过调控下游TGF-β信号通路影响血管内皮细胞功能，从而参与PE发病。
关键词： 子痫前期; 微小RNA-365a-3p; 血管内皮细胞功能; 转化生长因子-β
严兆华 , 郑健彬 , 张娜 , 曹春燕 , 颜露春 . miR-365a-3p通过TGF-β信号通路影响血管内皮细胞功能参与子痫前期的发病机制[J]. 实用医学杂志, 2024 , 40(16) : 2263 -2269 . DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2024.16.011
Objective To explore the mechanism of microRNA （miRNA）-365a-3p affecting the function of vascular endothelial cells involved in the pathogenesis of preeclampsia （PE）. Methods Primary human umbilical vein endothelial cells （HUVECs） were set as a NC group （transfected miR-365a-3p NC）， a mimics group （transfected miR-365a-3p mimics） and a inhibitor group （transfected miR-365a-3p inhibitor）. Logarithmic HUVECs cells were set as the blank group. The cell proliferation， migration and angiogenesis in each group were detected. Dual luciferin assay verified the targeting relationship between miR-365a-3p and downstream gene. The protein expressions of TGF-β1， Smad4 and Smad7 in each group were detected. Results Compared with the blank group and the NC group， the absorbance value and mobility of 24， 48 and 72 h were decreased （P < 0.05）， the number of tubular structures per field were decreased in the mimics group （P < 0.05）， the absorbance value and mobility of 24， 48 and 72 h were increased （P < 0.05）， and the number of tubular structures per field were increased in the inhibitor group （P < 0.05）. Dual luciferin assay showed that Smad7 was a target gene of miR-365a-3p. Compared with the blank group and the NC group， the protein expressions of TGF-β1 and Smad4 in the mimics group were increased （P < 0.05）， while the protein expression of Smad7 was decreased （P < 0.05）. The protein expression levels of TGF-β1 and Smad4 in the inhibitor group were decreased （P < 0.05）， while the protein expression levels of Smad7 were increased （P < 0.05）. Conclusion miR-365a-3p may affect the function of vascular endothelial cells by regulating the downstream TGF-β signaling pathway， and thus participate in the pathogenesis of PE.
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