p62/SQSTM1在非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭转移中的作用
Role and potential mechanisms of p62/SQSTM1 on migration and metastasis of non⁃small cell lung cancer
Received date: 2023-10-01
Online published: 2024-01-24
目的 探讨自噬调控多功能蛋白p62/SQSTM1对非小细胞肺癌生物学行为的影响和调控机制。 方法 RT-qPCR检测p62在正常人支气管上皮细胞和非小细胞肺癌细胞中的表达情况；CCK-8、划痕和Transwell实验分别检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响；Western blot实验检测抑制和促进p62表达后对非小细胞肺癌细胞凋亡相关蛋白（Bcl-2和Bax）和自噬相关蛋白（ATG5和Becline1）表达水平的影响；裸鼠皮下成瘤实验检测抑制p62表达后对非小细胞肺癌细胞体内肿瘤质量的影响。 结果 癌旁组织p62表达（1.01 ± 0.08）低于肺癌组织（2.81 ± 0.17）（P < 0.05）；p62在si-NC、si-p62、pcDNA-NC、pcDNA-p62组的表达水平分别为1.02 ± 0.03、0.62 ± 0.07、1.03 ± 0.01、2.69 ± 0.12。与si-NC组细胞比较，si-p62组细胞中的p62表达显著降低（P < 0.05）；与pcDNA-NC组细胞比较，pcDNA-p62组细胞中的p62表达显著升高（P < 0.05）；转染si-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著降低（P < 0.05），而转染pcDNA-p62后细胞增殖、迁移和侵袭能力显著升高（P < 0.05）；转染si-p62后，抗凋亡蛋白Bcl-2（0.31 ± 0.04）、自噬相关蛋白ATG5（0.48 ± 0.02）和Becline1表达水平（0.37 ± 0.03）明显降低，而促凋亡蛋白Bax表达水平（0.59 ± 0.07）明显升高（P < 0.05）；而转染pcDNA-p62后，Bax蛋白水平（0.12 ± 0.02）降低，而Bcl-2（0.79 ± 0.07）、ATG5（0.93 ± 0.07）和Becline1表达水平（0.96 ± 0.04）明显升高（P < 0.05）；与sh-NC组（2.50 ± 0.12）比较，sh-p62组（1.12 ± 0.08）小鼠的移植瘤质量明显减小（P < 0.05）。 结论 p62可以通过调控自噬促进非小细胞肺癌细胞A549的体内外生长。
马雪 , 周世辉 . p62/SQSTM1在非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭转移中的作用[J]. 实用医学杂志, 2024 , 40(1) : 13 -18 . DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2024.01.003
Objective To investigate the effect and regulatory mechanism of autophagy related multifunctional protein p62/SQSTM1 on biological behavior in non?small cell lung cancer （NSCLC）. Methods RT?qPCR was used to detect the expression of p62 in normal lung cells and NSCLC cells. CCK?8， wound?healing and Transwell assays were used to detect the effects of inhibition and promotion of p62 expression on the proliferation， migration and invasion in NSCLC cells. Western blotting was used to detect the effects of inhibition and promotion of p62 expression on the expression of apoptosis?related proteins （Bcl?2 and Bax） and autophagy?related proteins （ATG5 and Becline1） in NSCLC cells. A nude mouse transplantation tumor experiment was used to detect the effect of inhibiting p62 expression on the tumor volume and mass of NSCLC cells in vivo. Results Compared with that in normal lung cells， the expression level of p62 in A549 cells was the highest. Cell function experiments in vitro showed that inhibition of p62 expression reduced the abilities of proliferation， migration and invasion in A549 cells， and suppressed autophagy and induced apoptosis. Consistently， p62 overexpression has the opposite effects. In addition， animal experiments in vivo showed that inhibition of p62 expression decreased the tumor volume and mass of tumor?bearing mice. Conclusion p62 could promote the growth of NSCLC A549 cell in vivo and in vitro by modulating autophagy.
Key words： non?small cell lung cancer; autophagy; proliferation; migration; invasion
| 1 | FRICK C， RUMGAY H， VIGNAT J， et al. Quantitative estimates of preventable and treatable deaths from 36 cancers worldwide： a population-based study［J］. Lancet Glob Health， 2023，11（11）：e1700-e1712. |
| 2 | SMIDA T， BRUNO T C， STABILE L P. Influence of Estrogen on the NSCLC Microenvironment： A Comprehensive Picture and Clinical Implications［J］. Front Oncol， 2020，10：137. |
| 3 | LU S， WU L， JIAN H， et al. Sintilimab plus bevacizumab biosimilar IBI305 and chemotherapy for patients with EGFR-mutated non-squamous non-small-cell lung cancer who progressed on EGFR tyrosine-kinase inhibitor therapy （ORIENT-31）： first interim results from a randomised， double-blind， multicentre， phase 3 trial［J］. Lancet Oncol， 2022，23（9）：1167-1179. |
| 4 | CHAUDHRY G E， AKIM A M， SUNG Y Y， et al. Cancer and Apoptosis［J］. Methods Mol Biol， 2022，2543：191-210. |
| 5 | RUSSELL R C， GUAN K L. The multifaceted role of autophagy in cancer［J］. EMBO J， 2022，41（13）：e110031. |
| 6 | ZHANG Z， SHI J， NICE E C， et al. The Multifaceted Role of Flavonoids in Cancer Therapy： Leveraging Autophagy with a Double-Edged Sword［J］. Antioxidants （Basel）， 2021，10（7）：1138. |
| 7 | VARGAS J N S， HAMASAKI M， KAWABATA T， et al. The mechanisms and roles of selective autophagy in mammals［J］. Nat Rev Mol Cell Biol， 2023，24（3）：167-185. |
| 8 | TAN C T， SOH N J H， CHANG H C， et al. p62/SQSTM1 in liver diseases： the usual suspect with multifarious identities［J］. FEBS J， 2023，290（4）：892-912. |
| 9 | ZENG X， ZHANG Y D， MA R Y， et al. Activated Drp1 regulates p62-mediated autophagic flux and aggravates inflammation in cerebral ischemia-reperfusion via the ROS-RIP1/RIP3-exosome axis［J］. Mil Med Res， 2022，9（1）：25. |
| 10 | KUMAR A V， MILLS J， LAPIERRE L R. Selective Autophagy Receptor p62/SQSTM1， a Pivotal Player in Stress and Aging［J］. Front Cell Dev Biol， 2022，10：793328. |
| 11 | 陈秀英， 于莉， 周君阳， 等. p62基因敲除后食管鳞状细胞癌 EC109 细胞生物学行为变化［J］. 山东医药， 2020， 60（2）： 10-13. |
| 12 | LINARES J F， CID-DIAZ T， DURAN A， et al. The lactate-NAD+ axis activates cancer-associated fibroblasts by downregulating p62［J］. Cell Rep， 2022，39（6）：110792. |
| 13 | FAN X， HUANG T， TONG Y， et al. p62 works as a hub modulation in the ageing process［J］. Ageing Res Rev， 2022，73：101538. |
| 14 | KOMATSU M. p62 bodies： Phase separation， NRF2 activation， and selective autophagic degradation［J］. IUBMB Life， 2022，74（12）：1200-1208. |
| 15 | CHEN X， LI J， KANG R， et al. Ferroptosis： machinery and regulation［J］. Autophagy， 2021，17（9）：2054-2081. |
| 16 | BERGMANN R， GULOTTA G， ANDREONI F， et al. The group A Streptococcus interleukin-8 protease SpyCEP promotes bacterial intracellular survival by evasion of autophagy［J］. Infect Microbes Dis， 2022，4（3）：116-123. |
| 17 | HU Y J， ZHONG J T， GONG L， et al. Autophagy-Related Beclin 1 and Head and Neck Cancers［J］. Onco Targets Ther， 2020，13：6213-6227. |
| 18 | WHITE J， SUKLABAIDYA S， et al. Multifaceted roles of TAX1BP1 in autophagy［J］. Autophagy， 2023，19（1）：44-53. |
| 19 | SOUKUP A A， BRESNICK E H. GATA2 +9.5 enhancer： from principles of hematopoiesis to genetic diagnosis in precision medicine［J］. Curr Opin Hematol， 2020，27（3）：163-171. |
| 20 | QIN S， GENG H， WANG G， et al. Suffruticosol C-Mediated Autophagy and Cell Cycle Arrest via Inhibition of mTORC1 Signaling［J］. Nutrients， 2022，14（23）：5000. |
| 21 | YANG K， LUAN L， LI X， et al. ERK inhibition in glioblastoma is associated with autophagy activation and tumorigenesis suppression［J］. J Neurooncol， 2022，156（1）：123-137. |
| 22 | SCHWERTHEIM S， K?LSCH J， JASTROW H， et al. Characterization of two types of intranuclear hepatocellular inclusions in NAFLD［J］. Sci Rep， 2020，10（1）：16533. |
| 23 | YANG S， LI F， LU S， et al. Ginseng root extract attenuates inflammation by inhibiting the MAPK/NF-κB signaling pathway and activating autophagy and p62-Nrf2-Keap1 signaling in vitro and in vivo［J］. J Ethnopharmacol， 2022，283：114739. |
| 24 | YU T， YANG X， FU Q， et al. TRIM11 attenuates Treg cell differentiation by p62-selective autophagic degradation of AIM2［J］. Cell Rep， 2023，42（10）：113231. |
| 25 | LIU J， LIU Y， WANG Y， et al. TMEM164 is a new determinant of autophagy-dependent ferroptosis［J］. Autophagy， 2023，19（3）：945-956. |
/
| 〈 |
|
〉 |