目的 探讨氯普噻吨通过调节蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路对人急性髓系白血病（AML）细胞自噬和凋亡的影响。 方法 以SKNO-1、MOLM-13两个细胞系为研究对象，0、20、40、60 μmol/L氯普噻吨分别处理SKNO-1、MOLM-13细胞6、12、24 h，CCK-8检测细胞增殖情况。实验分为4组，对照组正常培养、SC79组用5 mg/L SC79处理细胞2 h，氯普噻吨组用40 μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h，氯普噻吨+SC79组在SC79组基础上添加40 μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h。单丹磺酰尸胺（MDC）染色检测自噬的发生情况；流式细胞术检测细胞凋亡率；蛋白质免疫印迹检测自噬相关蛋白SQSTM1/p62、微管相关蛋白1轻链3B（LC3B），凋亡相关蛋白聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶（PARP）、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3（caspase3）、激活型caspase3（cleaved caspase3）以及Akt/mTOR信号通路相关蛋白Akt、磷酸化（p）-Akt、mTOR、p-mTOR表达情况。 结果 在SKNO-1、MOLM-13细胞中，6、12、24 h时，与0 μmol/L氯普噻吨相比，20、40、60 μmol/L氯普噻吨处理后细胞增殖抑制率升高（P < 0.05）；在同一时间点，随着氯普噻吨浓度的升高，细胞增殖抑制率升高，40 μmol/L氯普噻吨处理细胞12 h进行接下来研究。在SKNO-1、MOLM-13细胞中，与对照组相比，SC79组细胞凋亡率、自噬小体阳性率，LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低（P < 0.05），SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高（P < 0.05）；而氯普噻吨组表现出相反趋势（P < 0.05）；在SC79组基础上添加氯普噻吨，与氯普噻吨组相比，细胞凋亡率、自噬小体阳性率，LC3B、PARP、cleaved caspase3/caspase3蛋白表达水平降低（P < 0.05），SQSTM1/p62、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR蛋白表达水平升高（P < 0.05）。 结论 氯普噻吨能够抑制Akt/mTOR通路促进人AML细胞自噬和凋亡。

Objective To investigate the impacts of chlorprothixene on autophagy and apoptosis in human acute myeloid leukemia （AML） cells by regulating the protein kinase B （Akt）/mammalian target of rapamycin （mTOR） pathway. Methods Two cell lines， SKNO-1 and MOLM-13， were used as the research objects， and they were treated with （0， 20， 40， 60） μmol/L chlorprothixene for （6， 12， 24） h， respectively， CCK-8 was performed to detect cell proliferation.Experiments were divided into control group （normal culture）， SC79 group （5 mg/L SC79 treated cells for 2 h），chlorprothixene group （40 μmol/L chloroprotixol treated cells for 12 h）， chlorprothixene + SC79 group （40 μmol/L chlorprothixene was added to the cells for 12 h on the basis of the group），monodansylcadaverine （MDC） staining was performed to measure the occurrence of autophagy；flow cytometry was performed to measure cell apoptosis rate；Western blot was performed to measure autophagy-related protein SQSTM1/p62， microtubule-related protein 1 light chain 3B （LC3B）， apoptosis-related protein poly （ADP-ribosyltransferase） （PARP）， aspartate-specific cysteine protease 3 （caspase3）， activated caspase3 （cleaved caspase3） and Akt/mTOR signaling pathway related proteins Akt， phosphorylated （p）-Akt， mTOR and p-mTOR. Results In SKNO-1 and MOLM-13 cells， at （6， 12， 24） h， compared with 0 μmol/L chlorprothixene， （20， 40， 60） μmol/L chlorprothixene treatment increased the inhibition rate of cell proliferation （P < 0.05）；at the same time point， as the concentration of chlorprothixene increased， the inhibition rate of cell proliferation increased， and 40 μmol/L chlorprothixene treatment for 12 h was used for the next study.In SKNO-1 and MOLM-13 cells， compared with the control group， the apoptosis rate， autophagosome positive rate， LC3B， PARP， cleaved caspase3/caspase3 protein expression levels in SC79 group decreased （P < 0.05）， the SQSTM1/p62， p-Akt/Akt and p-mTOR/mTOR protein expression levels increased （P < 0.05）；the chlorprothixene group showed the opposite trends （P < 0.05）；after adding chlorprothixene on the basis of SC79 group， the apoptosis rate， autophagosome positive rate， LC3B， PARP， cleaved caspase3/caspase3 protein expression levels decreased than chlorprothixene group （P < 0.05）， the protein expression levels of SQSTM1/p62， p-Akt/Akt and p-mTOR/mTOR increased （P < 0.05）. Conclusion Chlorprothixene can inhibit the Akt/mTOR pathway and promote autophagy and apoptosis in human AML cells.