实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (3): 314-318.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.03.008
CHEN Xi,ZHU Yueying,SHI Dianyu,YAN Shuai,TANG Guodong,ZOU Yu
摘要: 目的 探讨长链非编码RNA(LncRNA)HOX 转录本反义RNA(HOTAIR)通过调控靶向小分子 RNA⁃30d(miR⁃30d)影响鼻咽癌细胞侵袭和迁移的机制。方法 在鼻咽癌 CNE⁃2 细胞中转染 HOTAIR siRNA,使用实时定量聚合酶链反应(RT⁃qPCR)测定转染效果,Transwell 法测定肿瘤细胞侵袭及迁移能力,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中上皮型钙黏蛋白(E⁃cadherin)、波形蛋白(vimentin)和葡萄糖 调节蛋白 78(GRP78)的表达;生物信息学软件分析 HOTAIR 与 miR⁃30d 区域结合位点,利用双荧光素酶报 告系统确定两者结合关系;用 RT⁃qPCR 方法检测下调 HOTAIR 后鼻咽癌细胞中 miR⁃30d 表达的变化。将 HOTAIR siRNA 和 miR⁃30d inhibitor 共转染至CNE⁃2细胞中,用上述方法分析细胞侵袭、迁移及E⁃cadherin、 vimentin 和 GRP78 蛋白表达的变化。结果 敲减 HOTAIR 表达后,CNE⁃2 细胞的侵袭和迁移能力下降,细胞中 vimentin和GRP78 蛋白水平降低,E⁃cadherin蛋白水平升高;HOTAIR 靶向调控 miR⁃30d 的表达,敲减 HOTAIR 的表达可以提高CNE⁃2细胞中miR⁃30d的水平,miR⁃30d inhibitor可以明显逆转敲减 HOTAIR 对 CNE⁃2细胞侵袭、迁移能力以及E⁃cadherin、vimentin和GRP78蛋白表达的影响。结论 HOTAIR通过负调控 miR⁃30d影响GRP78和上皮细胞⁃间充质转化(EMT