实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (12): 1520-1528.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.12.003
不同基因型胶质母细胞瘤细胞系辐射抵抗性差异研究
简海锋, 梁惠平, 岑柏宏, 袁亚维
广州医科大学附属肿瘤医院放疗科(广州510095)
Differences of glioblastoma cells of different genotypes in radiation resistance
JIAN Haifeng,LIANG Huip⁃ ing,CEN Bohong,YUAN Yawei.
Department of Radiation Oncology,Affiliated Cancer Hospital of Guangzhou Medi⁃ cal University,Guangzhou 510095,China
摘要:
目的 探讨不同基因型胶质母细胞瘤细胞系辐射抵抗性的差异及其原因。方法 选取三 种不同基因型 GBM 细胞系(U87MG、U251MG、U118MG),利用外显子测序技术检测 P53、PTEN 基因突变情 况,蛋白免疫印迹检测 MGMT 表达情况。不同剂量(2、5、10 Gy)辐射后,采用流式细胞术检测细胞凋亡水 平、平板克隆形成检测细胞增殖能力,分析其辐射抵抗性。利用蛋白免疫印迹检测 DNA 损伤标记蛋白 (γH2AX)、NF⁃κB效应分子(RELA/p65)及EGFR在辐射后48 h内激活情况,分析DNA损伤与NF⁃κB及EGFR 信号通路激活的相关性。结果 U87MG、U251MG、U118MG 均存在 P53 与 PTEN 的突变位点,其中 U87MG、 U251MG 低表达 MGMT,U118MG 高表达 MGMT。经过 2、5、10 Gy 辐射后 48 h,各剂量均存在凋亡率变化 值:U87MG > U118MG > U251MG,存活分数:U251MG > U118MG > U87MG。三种细胞系经辐射后γH2AX、 RELA/p65、EGFR 的激活均存在时间与剂量差异性。结论 辐射抵抗性:U251MG > U118MG > U87MG,提 示 GBM 细胞系辐射抵抗性与其基因型有关。三种细胞系辐射后 NF⁃κB 通路与 EGFR 通路的激活存在差 异,最终导致其辐射抵抗性差异。