实用医学杂志 ›› 2021, Vol. 37 ›› Issue (4): 441-445.doi: 10.3969/j.issn.1006⁃5725.2021.04.005
任志磊, 杨崇哲, 银孟卓, 黄凯华, 刘丰
Effects of new constructed rat Kruppel ⁃ like factor 14 adenovirus vector on cardiomyocyte hypertrophy
REN Zhilei,YANG Chongzhe,YIN Mengzhuo,HUANG Kaihua,LIU Feng
Department of Geriactrics,Guangzhou First People′s Hospital,Guangzhou Medical University,Guangzhou 510180,China
摘要:
目的 检测生理状态和病理性肥大时大鼠乳鼠心肌细胞(NRVM)内Kruppel样因子14(KLF14)的表达水平。构建大鼠KLF14腺病毒载体,感染大鼠NRVM稳定高表达KLF14,探讨其对心肌细胞肥大的影响。方法 根据NCBI数据库KLF14的序列合成并构建pHBAd⁃MCMV⁃RFP⁃KLF14重组质粒,PCR和测序鉴定 后通过大肠杆菌扩增,在HEK 293细胞中包装成KLF14腺病毒。用KLF14腺病毒或阴性对照红色荧光蛋白 (RFP)腺病毒感染 NRVM,使用异丙肾上腺素(ISO)刺激 NRVM 诱导心肌细胞肥大,RT⁃PCR 检测 BNP 和 KLF14的表达水平。结果 PCR和测序鉴定证实KLF14腺病毒质粒构建成功。RT⁃PCR检测感染KLF14腺病 毒可以显著上调KLF14在NRVM中的表达,增加ISO上调的BNP的表达。结论 生理情况下,KLF14在心肌细胞中低丰度表达,病理性肥大时表达升高。KLF14过表达促进ISO诱导的心肌细胞肥大。